ДНК на вируса на Epstein-Barr (EBV) в кръвта (количествено)

Главна информация

Вирусът на Epstein-Barr (EBV) е свързан с широк спектър от доброкачествени и злокачествени заболявания, включително: инфекциозна мононуклеоза, лимфом, посттрансплантационен лимфопролиферативен синдром и назофарингеален карцином.

Определянето на вирусния геном EBV-DNA се използва все по-често в клиничните лаборатории при диагностика и мониторинг на заболявания, индуцирани от тази инфекция 6 .

EBV инфекциите са широко разпространени, така че до 35-40-годишна възраст 95% от възрастните са влезли в контакт с този вирус. Много деца получават инфекцията в началото на живота, но в повечето случаи тя протича безсимптомно или се развива като лека инфекция на горните дихателни пътища 7. При юноши и млади възрастни първичната EBV инфекция може да причини, в 35-50% от случаите, инфекциозна мононуклеоза - доброкачествено лимфопролиферативно състояние, характеризиращо се с висока температура, физическа астения, фарингит и полиаденопатия.

Първичните инфекции се характеризират с повишена виремия, която намалява до неоткриваеми стойности, тъй като имунната система разпознава и контролира инфекцията. Подобно на други херпесни вируси, EBV може да остане в тялото в неактивно състояние в продължение на години (латентна инфекция). Периодичните реактивации се придружават от преходна виремия. По-късно някои пациенти развиват новообразувания, свързани с EBV инфекция, и имат много високи нива на виремия като определяща характеристика. По този начин количественото определяне на EBV-ДНК не само открива активна инфекция, но е и "туморен маркер" за някои видове злокачествени процеси 2; 3; 4; 9 .

Туморите, свързани с EBV, са лимфопролиферативни синдроми след трансплантация, назофарингеален карцином, лимфоми, свързани със синдром на придобита имунна недостатъчност (СПИН) и лимфом на Бъркит. .

Целевата клетка за EBV инфекция е лимфоцит В. Имунокомпрометирани пациенти, които нямат анти-EBV антитела (често деца) са изложени на риск от развитие на остра EBV инфекция, която може да причини лимфопролиферативни синдроми; те включват посттрансплантационни лимфопролиферативни синдроми и лимфоми, свързани със синдром на придобита имунна недостатъчност (СПИН) 5. Честотата на посттрансплантационните лимфопролиферативни синдроми варира от 1% при пациенти с бъбречна трансплантация до 9% при пациенти с трансплантация на сърце/бял дроб и 12% при пациенти с трансплантация на панкреас 7 .

Препоръки за количествено определяне на EBV-ДНК

Серологичната диагноза рядко е полезна при оценка на инфекцията при имунокомпрометирани пациенти и при проследяване на EBV-индуцирани тумори, особено след трансплантация. Тъй като културата на вируса не е достъпна за клиничната лаборатория, се счита, че EBV-ДНК може да служи като "туморен маркер" при оценката на лимфопролиферативни заболявания и назофарингеален карцином 2. Нивото на ДНК в кръвта (количествено определена чрез количествена PCR) започва да се увеличава няколко месеца преди началото на лимфопролиферативното заболяване и намалява след започване на терапията. Поради тази причина определянето на EBV-ДНК в кръвта може да бъде предсказващ маркер при податливи пациенти, като е възможно да се оцени рискът от развитие на лимфопролиферативни синдроми след трансплантация през следващите 3-4 месеца в зависимост от стойностите на виремия. Също така, серийните определяния на EBV-DNA са полезни при оценка на отговора към лечението на пациенти с лимфопролиферативни заболявания 6 .

При назофарингеален карцином виремията е висока в началото, намалява по време на лъчетерапията, става неоткриваема след получаване на ремисия, но продължава при рецидиви 1; 4 .

Обучение на пациента - не се изисква 6 .

Събран образец - кръв ще дойде 6 .

Контейнер за прибиране на реколтата - вакуутан, съдържащ EDTA като антикоагулант 6 .

Количество реколта - колкото вакуумът позволява 6 .

Необходима е обработка след прибиране на реколтата - тест не ще се центрофугира 6 .

Причини за отхвърляне на доказателствата - стари, коагулирани, хемолизирани проби; използване на хепарин като антикоагулант 6 .

Тествайте стабилността - кръвните проби са стабилни 3 дни при 2-8 ° C. Пробите не замръзват! 6 .

Метод - PCR в реално време: верижна полимеризационна реакция с откриване в реално време на натрупания PCR продукт, чрез измерване на излъчената флуоресценция 6 .

Граница на откриване - Границата на откриване на работния метод в линейния диапазон (измерим) е 2415 IU/mL. Аналитичната чувствителност е 1800 IU/mL. 1 IU/mL = 0.61 копия/mL 6 .

Тълкуване на резултатите

Стойностите на виремия, които прогресивно се увеличават при серийни определяния, предполагат посттрансплантационни лимфопролиферативни синдроми.

Имунокомпрометирани пациенти, които имат реактивация на инфекцията, но не развиват лимфопролиферативни синдроми, обикновено имат ниски нива на виремия.

В някои ситуации анализаторът може да посочи стойности под границата на откриване на метода. Те ще бъдат съобщени със споменаването: „Резултатът може да не бъде възпроизводим поради малкия брой копия на вирусния геном“ 8 .

Граници и смущения

Серийните определяния на EBV-ДНК са много по-полезни при оценката на риска от посттрансплантационен лимфопролиферативен синдром, отколкото изолирана виремия 8 .

1. Chan AT, Lo YM, Zee B, Chan LY, Ma BB, Leung SF, Mo F, Lai M, Ho S, Huang DP, Johnson PJ. ДНК на вируса на плазмата на Epstein-Barr и остатъчно заболяване след лъчетерапия за недиференциран назофарингеален карцином. В J Natl Cancer Inst, 2002; 94: 1614-1619.

2. От Дейвид Х. Персинг, Томас Ф. Смит, Фред С. Теновър. PCR откриване и типизиране на вируса на Epstein-Barr. В Диагностична молекулярна микробиология. 1993. 344-355

3. Вентилатор H, Gulley ML. Измерване на вирусно натоварване на Epstein-Barr като маркер за свързано с EBV заболяване. В Mol Diagn. 2001; 6: 279-289.

4. Gulley ML, Tang W. Лабораторни анализи за заболяване, свързано с вируса на Epstein-Barr. В J Molec Diagn, 2008; 10: 279-292.

5. Гай Бойвин. Диагностика на херпесвирусна инфекция на централната нервна система. In Herpes 11. Supplement 2004; 2, 49-54.

6. Лаборатория Синево. Специфични препратки към използваната технология на работа. 2015. Ref Тип: Каталог.

7. Luderer Rianne et al. PCR за вируси на Epstein-Barr в реално време за диагностика на първични EBV инфекции и реактивиране на EB. В Молекулярна диагностика, 2005; 9 (4): 195-200.

8. Mayo Clinic/Mayo Medical LaboratoriesТестови каталози и ръководства. Откриване на ДНК на вируса на Epstein-Barr (EBV) чрез PCR, количествено, кръв. www.mayomedicallaboratories.com. Ref Ref: Интернет комуникация.

9. Ryan JL, Fan H, Swinnen LJ, Schichman SA, Raab-Traub N, Covington M, Elmore S, Gulley ML. ДНК на вируса на Epstein-Barr (EBV) в плазмата не се капсулира при пациенти със злокачествени заболявания, свързани с EBV. В Diagn Mol Pathol. 2004; 13: 61-68.