Гликиран хемоглобин (Hb A1c)

Главна информация

Извършването на кръвна глюкоза позволява оценка на текущото състояние на метаболизма на въглехидратите при пациенти с диабет по време на вземане на кръв. За разлика от това, определянето на гликиран хемоглобин дава ретроспективна оценка на гликемичния статус, независимо от циркадния ритъм, диетата и други преходни колебания в концентрацията на глюкоза в кръвта; 2; 4; 5 .

Значението на гликирания хемоглобин или HbA1c като маркер за гликемичен контрол при пациенти с диабет беше подчертано от резултатите от двете големи проучвания - DCCT (Diabetes Control and Complications Trial) и UKPDS (United Kingdom Prospective Diabetes Study). Те убедително демонстрираха благоприятния ефект на интензивния гликемичен контрол както върху метаболитните параметри (гликемия и HbA1c), така и върху дългосрочните усложнения (микро- и макросъдови) на диабет тип I или II и установиха някои специфични терапевтични цели, базирани на HbA1c 8 .

Терминът "гликиран хемоглобин" (GHb) описва различни съединения, които имат общо гликирането на хемоглобина - реакцията на не-ензимно свързване на глюкоза или други хексози към молекулата на хемоглобина. Гликацията може да възникне при няколко аминокиселинни остатъка в структурата на хемоглобина и протича на два етапа:

-кондензация на глюкоза със свободната аминогрупа на хемоглобина генерира Schiff база (нестабилен алдимин);

-Феноменът на пренареждането на Амадори води до стабилен кетоамин (в случай на глюкоза, фруктозамин).

Първоначално терминът "гликозилиран хемоглобин" беше широко използван, но като се има предвид, че реакциите на гликиране се различават химически от реакциите на гликозилиране, Съвместната комисия по биохимична номенклатура IUPAC-IUB (JBCN) препоръча термина " гликиран хемоглобин ”за описване на споменатите по-горе съединения 5 .

HbA1 означава общото количество гликиран хемоглобин и го диференцира от нормалния, негликиран хемоглобин А. Има няколко вида HbA1; HbA1c, наречен така, тъй като представлява третият индивидуален пик А1 при хроматографско разделяне, се оказва най-важната фракция на гликирания хемоглобин (75-80%). Според дефиницията на IFCC (Международната федерация по клинична химия), HbA1c представлява необратим гликиран хемоглобин в един или и двата амино-терминални валина на β веригите.

Нивото на HbA1c в кръвта корелира както с полуживота на хемоглобина, така и със средното ниво на кръвната глюкоза през целия му живот. По този начин, повишаването на HbA1c е пропорционално на средното ниво на кръвната захар (средна кръвна захар) през последните 2-3 месеца преди тестването (съответстващо на средната продължителност на живота на еритроцитите) 2; 5; 6 .

Неотдавнашно проучване (2006-2008), спонсорирано от големи международни диабетни организации, по-точно дефинира математическата връзка между HbA1c и изчислената средна глюкоза (eAG). Въз основа на линеен регресионен анализ, тази връзка се определя от уравнението:

По този начин е възможно да се установи за всяка стойност на HbA1c съответната средна гликемия (eAG) 5:

Определянето на HbA1c е тест за оценка и дългосрочно проследяване на гликемичния контрол при пациенти с диабет. Той също така има предсказваща роля по отношение на риска от усложнения на диабета: кетоацидоза, нефропатия, ретинопатия. Може да оцени най-ефективния терапевтичен подход: орални антидиабетни средства, инсулин, трансплантация на β-клетки. Поради тези причини HbA1c трябва да се извършва рутинно при всички пациенти с диабет, както по време на диагностицирането, така и като част от непрекъснатото наблюдение 1; 2; 5; 6 .

Повечето асоциации препоръчват 6,5% или 7% HbA1c като терапевтична цел за пациенти с диабет. Честотата на тестването на HbA1c зависи от вида на диабета и стабилността на гликемичния контрол:

на 3-4 месеца, за пациенти с диабет тип I под конвенционално лечение;
на 1-2 месеца, за пациенти с диабет тип I под интензивно лечение;
на 6 месеца, за пациенти с диабет тип II със стабилен гликемичен контрол;
на всеки 1-2 месеца за бременни жени с диабет;
на всеки 1-2 месеца за пациенти с гестационен диабет 1; 2 .

Въпреки че от 1994 г. ADA (Американска диабетна асоциация) е установила специфични терапевтични цели за HbA1c, голямата вариабилност между резултатите, получени чрез различни методи, първоначално ограничава правилното им използване от клиницистите. За да могат резултатите от HbA1c да бъдат сравними с тези от проучванията на DCCT/UKPDS и по този начин да се постигне тяхната стандартизация, през 1996 г. беше въведена NGSP (Национална програма за стандартизация на гликохемоглобина). Чрез мрежа от референтни лаборатории NGSP сертифицира методите HbA1c на различни производители като проследими до DCCT. За да се гарантира стабилността на резултатите, NGSP препоръчва производителите да сертифицират своите методи ежегодно 8 .

Доскоро използването на теста HbA1c при диагностицирането на диабет не се препоръчваше, главно поради липсата на стандартизация на резултатите. През 2010 г. обаче ADA препоръчва включването на HbA1c в диагностичните критерии за диабет при гранична стойност от 6,5% (Тестът трябва да се извърши по стандартизиран метод, сертифициран по DCCT и NGSP). При установяването на това решение бяха взети предвид предимствата на HbA1c пред кръвната захар:

Не се изискват условия на гладно;
По-висока аналитична стабилност;
Индивидуална биологична вариация ↓ в сравнение с гликемията;
Вариации ↓ в условия на стрес и интеркурентни заболявания.

От друга страна, има някои недостатъци на HbA1c:

По-висока цена;
Липса на наличност на тестове в някои държави/региони;
Липса на корелация на HbA1c със средната кръвна глюкоза при някои хора;
HbA1c не е от значение при пациенти с абнормен обмен на еритроцити (хемолитична анемия, желязодефицитна анемия); В тези ситуации диагнозата на диабета трябва да се основава изключително на нивата на кръвната захар.

ADA също препоръчва на пациенти със стойности на HbA1c в диапазона 5,7-6,4% да бъдат включени в категорията на тези с висок риск от диабет, заедно с тези с нарушена глюкоза на гладно (IFG) или нарушен глюкозен толеранс (IGT) 1 .

прибиране на реколтата

Обучение на пациента - на гладно (на гладно) или след хранене (след хранене) 7.

Събран образец - sange venos7.

Контейнер за прибиране на реколтата - вакуутан с EDTA K37.

Количество реколта - колкото вакуумът позволява7.

Тествайте стабилността - 7 дни при 2-8 ° C7.

Метод и интерпретация на резултатите

Метод - имунотурбидиметричен (стандартизиран DCCT: Проба за контрол и усложнения на диабета и сертифициран NGSP: Национална програма за стандартизация на гликохемоглобина). Поради високата специфичност на анти-HbA1c антитела за 4-аминокиселинна последователност в N-края на β-гликираната верига, тестът не повлиява повечето патологични хемоглобини, карбамилиран хемоглобин, открит при уремични пациенти, или ацетилиран хемоглобин, генериран от терапия с аспирин. По този начин тестът измерва "истинския" HbA1c, съгласно дефиницията на IFCC. Определянето на HbA1c в цяла хемолизирана кръв се основава на реакция на турбидиметрично инхибиране:
-в първия етап HbA1c в пробата реагира с анти-HbA1c антитела и води до разтворими комплекси антиген-антитяло;
-на втория етап се добавят полихаптени, които реагират с излишък от анти-HbA1c, образувайки комплекси антитяло-полихаптен, които ще се определят имунотурбидиметрично.

Общата концентрация на хемоглобина се определя в отделен канал. В пробата от хемолизирана кръв освободеният хемоглобин се превръща в производно с характерен абсорбционен спектър, който ще се измерва бихроматично; изчисляването на HbA1c в проценти се извършва съгласно протокола DCCT/NGSP, като се използва формула за корекция:
% HbA1c = (HbA1c/Hb) x 91,5 + 2,157.

Референтни стойности - 4,8-6% (от общия хемоглобин) 7.

Граница на откриване - HbA1c: 0,2 g/dL (0,124 mmol/L)
- Hb 0,3 g/dL (0,186 mmol/L) 7.
Тълкуване на резултатите
• повишаване на Hb A1c показва наличие на хипергликемия през последните 2-3 месеца;
• стойностите са повишени при хора с лошо контролиран или новодиагностициран диабет;
• диабетът се контролира адекватно, когато се получат стойности под 7% 6;
• нивото на Hb A1c може да се увеличи до 20% в случай на недостатъчен гликемичен контрол;
• HbA1c намалява постепенно в продължение на няколко месеца, тъй като еритроцитите с нормален гликиран хемоглобин заместват тези с повишени нива2.

Повишен резултат, получен при асимптоматичен пациент, трябва да се повтори, за да се потвърди диагнозата диабет1.

Граници и смущения

В допълнение към диабета, повишаване на HbA1c може да се появи и в следните ситуации: желязодефицитна анемия, постсленектомия, полицитемия (поради известно удължаване на живота на еритроцитите).

Намаляване на бременността, хронична кръвозагуба, посттрансфузия и хемолитична анемия (поради намалена продължителност на живота на еритроцитите и последващо намаляване на експозицията на глюкоза) 2; 6.

се увеличава: аспирин, атенолол, бета-блокер, гемфиброзил, хидрохлоротиазид, индапамид, ловастатин, никардипин, пропранолол.

намалява: дефероксамил, дилтизем, еналаприл, глипизид, инсулин, лизиноприл, метформин, правастатин, рамиприл, верапамил.

• Аналитични интерференции: в много редки случаи при пациенти с моноклонални гамапатии, особено IgM (болест на Waldenström), получените резултати могат да бъдат неубедителни7.

1. Американска диабетна асоциация. Стандарти за медицинска помощ при диабет. В Diabetes Care, том 34, добавка 1, януари 2011 г.

2. Франсис Фишбах. Химия. В Наръчник за лабораторни и диагностични тестове. Lippincott Williams & Wilkins, USA, 8th Ed., 2009, 355-359.

3. Франсис Фишбах. Ефекти на лекарствата върху лабораторни тестове. В Наръчник за лабораторни и диагностични тестове. Липинкот Уилямс и Уилкинс, САЩ, 8-мо издание, 2009, 1242.

4. Гари Джон, IFCC. Постигане на глобална стандартизация на HbA1c: Все още няма.

5. Хелмут Р. Хенрихс. HbA1c-гликиран хемоглобин и захарен диабет, първо издание, Бремен: UNI-MED, 2009.

6. Жак Уолах. Ендокринни нарушения. В тълкуване на диагностични тестове. Издателство за медицински науки, Букурещ, 7-мо издание, 2006; 804 806.

7. Лаборатория Синево. Специфични справки за използваната работна технология през 2011 г. Тип на справка: Каталог.

8. Ранди Р. Литъл, Кърт Л. Ролфинг, Дейвид Б. Сакс, Национална програма за стандартизация на гликохемоглобина (NGSP). Състояние на измерването на хемоглобина А1с и цели за подобрение: от хаос до ред за подобряване на грижите за диабета. В Клинична химия, 57: 2, 205-214, 2011.