Култура на вагинална секреция (с антибиограма според случая)

Главна информация

Нормалната флора на женските полови органи варира в зависимост от рН и концентрацията на естроген в лигавицата, които са тясно свързани с възрастта, както следва:
- предпубертетна и постменопаузална флора е доминирана от стафилококи и коринебактерии (същата флора, която откриваме на повърхността на епитела);
- при сексуално активни жени микробната флора се променя, като се състои от Enterobacteriaceae, стрептококи, стафилококи, анаеробни бактерии (лактобацили, неспорулирани анаеробни бацили, анаеробни коки). Лактобацилите представляват нормалната вагинална микробна флора при тези жени.

Хемолитичният стрептокок от група В (Streptococcus agalactiae) присъства във вагиналната флора и може да се предаде на новородени (с появата на неонатални усложнения).

Класификация на инфекциите на женските полови органи

Инфекциите на женските полови органи са честа причина за гинекологични консултации. Те могат да се развият като:
• ендогенни инфекции, причинени от микроорганизми в нормалната вагинална флора;
• екзогенни инфекции, причинени по-специално от полово предавани микроорганизми:
- бактерии (Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis - серотипове D-K, Treponema pallidum)
- вируси (херпес симплекс - тип 2, папиломен вирус)
- протозои (Trichomonas vaginalis).

Друга класификация разделя инфекциите на женските полови органи на:

• ниско генитални инфекции - засяга вулвата, влагалището и шийката на матката - обикновено се появяват в резултат на инфекциозен сексуален контакт или в резултат на дисбаланс на нормалната генитална флора.

• високи генитални инфекции - засяга матката, фалопиевите тръби, яйчниците - възникват често като продължение на ниско генитални инфекции. Смята се, че микроорганизмите във влагалището и шийката на матката навлизат в маточната кухина и могат да достигнат до фалопиевите тръби и яйчниците през ендометриума.

Ниско генитални инфекции

Инфекциите на вулвата могат да бъдат бактериални, вирусни, гъбични или паразитни и могат да се появят или изолирано, или свързани с вагинит. Може да бъде:
- чести инфекции: фоликулит, циреи, пиодермия;
- специфични инфекции: Trichomonas vaginalis, гъбични инфекции, Treponema pallidum, Herpes simplex - тип 2, Papillomavirus (особено 6 и 11);
- по-рядко Sarcoptes scabiae.

Бартолин (възпаление на бартолиновите жлези, разположено в кръстовището на вулвата и вагината), може да бъде причинено от Neisseria gonorrhoeae, C. trachomatis или от обостряне на местната генитална флора. Блокирането на жлезистия канал от възпалителния процес може да причини абсцес, от който да се изолират аеробни и анаеробни микроби.

вагинит (най-често описван като вулвовагинит) могат да бъдат:
- специфични: произведени от гъбички, Trichomonas vaginalis, Treponema pallidum, Papilomavirus;
- неспецифични: - произведени от размножаването на нормалната вагинална флора;
- произведени от чужди тела - в случай на наличие на контрацептивни средства или при момичета при случайно въвеждане на чужди тела във влагалището.

Стафилококус ауреус, присъстващ във влагалището при 5-10% от здравите жени, може да предизвика гнойно отделяне и токсичен шок при използване на хиперабсорбиращи тампони по време на менструация.

При момичетата е възможен вулвовагинит с N. gonorrhoeae, C. trachomatis или Streptococcus pyogenes. В случаите с лоша хигиена са възможни случаи на вулвовагинит с Enterobius vermicularis, поради миграцията на паразита във влагалището.

вагиноза - невъзпалителен инфекциозен синдром - състои се в заместване на нормалната лактобациларна флора с анаеробни бактериални видове (Bacteroides spp, Prevotella spp, Porphyromonas spp, Peptostreptococcus spp, Mobiluncus spp), свързани с Gardnerella vaginalis. Тези бактериални видове са част от нормалната флора на влагалището, но в случай на вагиноза тяхното размножаване е до 1000 пъти по-голямо. Въпреки че инфекцията се развива главно по време на сексуална активност, тя може да се появи и при юноши и преди юноши.

цервицит
Ексфолирането на матката може да бъде повлияно от:
-T. vaginalis, Candida albicans - инфекции, които се развиват като цервико-вагинит;
-Папиломен вирус (особено типове 16 и 18) - участва в етиологията на интраепителните цервикални новообразувания;
-Херпес симплекс тип 2 - развива се с ендо и екзоцервикални язвени лезии.

Ендоколът на матката може да бъде мястото на инфекции с:
-N. gonorrhoeae - може да се развие асимптоматично при около 30% от заразените жени. Замърсяването на уретралната и ректалната лигавица може да причини съпътстваща локализация на тези нива, с клинични прояви на уретрит или проктит;
-C. trachomatis (D-K серотипове) - не причинява вагинит. Често пациентите имат инфекция с двойна етиология (гонококи с хламидия). В лабораториите на Synevo инфекцията с C. trachomatis може да бъде диагностицирана чрез откриване на антигена в секрета, събран от ендокола. Не се препоръчва събирането от дъното на задната торбичка (може да се получат фалшиво отрицателни резултати).

Диагностика на ниско генитални инфекции

Събирането на патологични продукти се извършва в гинекологични кабинети, с подходящи инструменти, обикновено от дъното на задната вагинална торбичка.

По време на прибиране на реколтата е добре да се извършат (дори в консултативната зала) два бързи теста, които могат да насочат диагнозата:
-определяне на рН на вагиналната секреция с помощта на индикаторна хартия (рН> 5 може да показва инфекция с T. vaginalis или наличие на вагиноза);
-тест за летливи амини ("тест за дишане") - чрез добавяне на няколко капки 10% разтвор на КОН върху вагиналната секреция, събрана върху клапата. Отделянето на неприятна миризма на развалена риба води до подозрение за вагиноза.

Вагиналното отделяне се събира на два тампона и два микроскопични предмета:
-тампон се вкарва в контейнера на Vagicult (специална среда за обогатяване и откриване на Trichomonas vaginalis и дрожди), от който ще се направи прясна подготовка между острието и ламелата. Изследването се извършва с 10x и 40x цел и позволява да се подчертаят паразитът T. vaginalis, дрождите - пъпки и хифи - и възпалителна реакция (интензивна при трихомониаза, отделна при кандидоза и отсъстваща при вагиноза);
-вторият тампон, събран на транспортна среда (Amies или Stuart), ще се използва за сеитба върху културална среда;
-микроскопичните стъкла ще бъдат оцветени по Gram (за оценка на вагиналната флора) и Giemsa (за оценка на възпалителната реакция).

При нормални условия Грам-положителната цитонамазка показва Грам-положителни бацили, прави или леко извити с успоредни страни, с променлива дебелина и дължина до полиморфизъм, понякога нишковидни, което представлява лактобациларната флора (Döderlein бацили). При вагиноза лактобациларната флора се заменя с грам-променливи бацили (G. vaginalis, Bacteroides spp.) И извити грам-отрицателни бацили (Mobiluncus). Вагинозата се характеризира с наличието на "клетки-следи" - повърхностни вагинални клетки, които имат изобилна бактериална флора на повърхността си. Наличието на Грам-положителни кръгло-овални образувания предполагат вагинална кандидоза.

Фиг. 21.5.5.1: Lactobacillus spp. (Грам оцветяване, x1000)

Нормален външен вид на вагинална проба: наличие на множество сквамозни епителни клетки, малко полиморфонуклеарни клетки, бацили на Doderlein.

Фиг. 21.5.5.2: Mobiluncus spp. И Gardnerella vaginalis (оцветяване на Грам, x1000)

Фиг. 21.5.5.3: Намазка, предполагаща бактериална вагиноза: (оцветяване по Gram, x1000)

Фиг. 21.5.5.4 Дрожди, налични във вагинална секреция (оцветяване по Gram, x1000)

Визуализацията на грам-отрицателни „диплоидни“ коки с появата на предимно интралейкоцитни кафени зърна най-вероятно показва инфекция с Neisseria gonorrhoeae.

Trichomonas vaginalis се вижда най-добре при нативния препарат. Той има кръгло-овална форма с размери 7-23/5-15 μm, обикновено има 4 предни бичура и един заден, което му придава бърза подвижност. Можете също така да видите вълнообразната мембрана и аксостил, който се движи по протежение на клетката. Паразитът може да се види и върху цитонамазката по Грам.

Фиг. 21.5.5.5 Neisseria gonorrhoeae (цвят на Грам, x1000)

Фиг. 21.5.5.6 Trichomonas vaginalis (оцветяване по Gram, x1000)

Посяването на секрета, събран върху буфера с транспортна среда, се извършва върху агарирана среда Columbia с 5% кръв на овен и лактозна среда с инкубация в обичайната атмосфера за 18-24 часа при 35–37 ° C. Изолираните микроорганизми се идентифицират до видовото ниво и се извършват. антибиограма само за микроби, чието присъствие е установено и върху оцветената по Грам цитонамазка, заедно с възпалителната реакция. Наблюдава се и присъствието на Streptococcus agalactiae при бременни жени през последния триместър на бременността.

При съмнение за инфекция с N. gonorrhoeae се извършва инкубация в атмосферата с 5% CO2.

В случай на съмнение за кандидоза, пробата ще бъде инокулирана върху средата на Sabouraud с хлорамфеникол. Candida albicans обикновено присъства във влагалището на 15-20% от жените, достигайки 30% през третия триместър на бременността. Следователно, масивната колонизация на влагалището2 е важна за Candida spp. Инфекция. След изолиране на дрождите в културата, противогъбичната програма ще бъде идентифицирана и изпълнена.

При момичетата събирането ще се извършва от отвора на влагалището или може да се събира ендовагинално, ако има подходящо оборудване; целта е да се диагностицира вулво-вагинит с S. pyogenes и N. gonorrhoeae.

Диагнозата на бартолинит се поставя чрез събиране на гноен ексудат с помощта на два тампона: един за микроскопия и един за засяване върху културна среда. Инкубацията трябва да се извършва както в аеробни, така и в анаеробни условия; присъствието на N. gonorrhoeae е особено проследено. В случай на „стерилна“ гной се подозира инфекция с C. trachomatis или Ureaplasma urealyticum.

Високи генитални инфекции

В зависимост от местоположението:
- на нивото на маточната лигавица: ендометрит;
- ако възпалението включва и маточния мускул: ендомиометрит.

Възниква остра инфекция: - след раждането или след аборт (вагинозата е рисков фактор) и след ентутеринни изследвания или интервенции (хистеросалпингография, имплантиране на спирала).

Етиологията им е разнообразна, включваща аеробни и анаеробни бактерии, които са част от ендогенната вагинална флора: стрептококи от група В, ентерококи, ентеробактерии, Gardnerella vaginalis, анаеробни грам-отрицателни бацили, Mycoplasma hominis, Clostridium perfringens (при септичен аборт, Streptococcus и др.).
В 10-20% от случаите може да се развие остър ендометрит с бактериемия.

Хроничен ендометрит (свързано с ендоцервицит и салпингит) може да бъде причинено от C. trachomatis (чрез възходящо размножаване) или Mycobacterium tuberculosis (по хематогенен път).

Възпаление на ендотубарния епител или тръби като цяло (салпингит) могат да бъдат причинени от:
- M. tuberculosis, N. gonorrhoeae, C.trachomatis - чрез интраканаликуларно размножаване;
- аеро-вагинална анаеробна флора (при постабортум или следродилен ендометрит);
- възпаление на мезосалпинкса и перитонеума, покриващо широкия лигамент: анексит.

Тъй като точното анатомично местоположение на инфекцията е трудно да се установи, се използва наименованието тазова възпалителна болест (лапароскопска диагноза).

Диагностика на високи генитални инфекции

Патологичният продукт се събира чрез въвеждане на катетър или стерилна сонда в маточната кухина, към която се адаптира стерилна спринцовка и се аспирира течност от ендометриума; след това към спринцовката е прикрепена стерилна игла, върхът на иглата е защитен със стерилен памучен тампон, въздушните мехурчета се отстраняват, върхът на иглата се запечатва с гумена запушалка и се изпраща в лабораторията възможно най-скоро.

При ендометрит след раждането или след аборт, кръвните култури се извършват и върху аеробни и анаеробни среди.

При възпалително заболяване на таза, при което се подозира инфекция с C. trachomatis, може да се използва серологично изследване.

За бактериологичната диагноза на генитална туберкулоза се събира менструална кръв или маточна лигавица, излекувана в предменструалния период2. Патологичните продукти за откриване на BK не се обработват в лабораториите на Synevo.

Проби, получени в лабораторията:
• изследва се микроскопски върху оцветени Грам и Гиемза цитонамазки;
• се засява върху културална среда: алум Колумбия с 5% кръв на овен (една плоча за аеробна инкубация и една за анаеробна инкубация) и агар Mac Conkey.

Изолирани бактериални видове се идентифицират до видовото ниво и се извършва антибиограма. Изследването за чувствителност на антибиотици не се извършва върху анаеробни микроби.