Разширен специфичен IgE профил (алергия Explorer) - ALEX

Главна информация

IgE-медиирана алергия и in vitro алергологични тестове

Разпространението на IgE-медиираните алергични заболявания се увеличава драстично, както в развитите, така и в развиващите се страни. Много деца страдат от тежки хранителни алергии и анафилаксия, а голям брой юноши и млади хора, засегнати от астма и алергичен ринит, са намалели в ежедневните дейности. Поради тези причини трябва да се подобри управлението на пациенти с алергични състояния 1 .

Друг проблем, свързан с употребата на алергенни екстракти, са гликопротеините, съдържащи се в екстрактите, които могат да взаимодействат с IgE в серума на пациентите, което води до фалшиво положителни резултати при определяне на специфични за алергена IgE. Гликаните, произведени от растения и насекоми, характеризиращи се с наличието на епитопи на фукоза и/или ксилоза, са наречени кръстосано реактивни въглехидратни детерминанти (CCD). Процентът на пациентите, чувствителни към CCD/растения/насекоми, се оценява на 23%. Тези пациенти с анти-CCD IgE показват кръстосана реактивност към всички растения, съдържащи CCD епитопи, което води до голям брой положителни резултати при специфични определяния на IgE, базирани главно на алергенни екстракти, имитиращи съществуването на множество сенсибилизации. От друга страна, се съобщава, че анти-CCD антителата са с ниско клинично значение. Следователно е от съществено значение да се намалят интерференциите, упражнявани от CCD 1 in vitro алергично тестване; .

Характеристики на теста ALEX

ALEX е in vitro диагностичен инструмент за алергична сенсибилизация, с който може да се определи едновременно разширен профил на специфични IgE срещу 282 алергена (152 „цели“ екстракта от алергени и 125 молекулярни компонента). Този тест обхваща по-голямата част от алергените за инхалатори, храна, латекс и отрова на Hymenoptera. Използва се технология „макрочипове“, при която алергените се разпределят под формата на петна по нитроцелулозна мембрана, съдържаща се в чип. Тестът определя количествен Специфичен IgE е насочен както към алергенните екстракти, така и към съответните молекулни компоненти (специфична и кръстосана реактивност). Комбинацията от алергенни екстракти с молекулни компоненти в същия тест позволява да се характеризира IgE сенсибилизацията, като се определя дали това е "истинска" реакция или кръстосана реактивност. Използването на CCD инхибитори в първата фаза на инкубация намалява интерференцията, упражнявана от CCD, увеличавайки специфичността на теста. Освен това се определят и общите IgE 5; 6 .

Според скорошно проучване ALEX има добра корелация с теста ImmunoCAP ISAC, най-широко използвания тест "микрочипове" в молекулярната алергология 5 .

Препоръки за извършване на ALEX теста - диагностика на алергични заболявания, заедно с анамнестични данни и клиничен преглед.

Използвайки молекулярни алергенни компоненти, тестът предоставя важна информация за:

посочване на специфична имунотерапия, по-специално при дихателни алергии и тези, причинени от отрови от насекоми;
рискът от тежки алергични реакции към храни (напр. Ara h 1,2,3 или 6 протеини за съхранение дават тежки алергични реакции към анафилактичен шок, докато протеините Ara h 8 и PR-10 не участват в сериозни реакции, и двете групи протеини дават положителни резултати при тестване с екстракти от фъстъци);
кръстосана реактивност (кръстосана реактивност).

Този тест е особено полезен за полисенсибилизирани пациенти и пациенти със синдром на орална алергия 5; 6 .

Обучение на пациента - à jeun (на гладно) или след хранене (след хранене) 6 .

Събран образец - венозна кръв 6 .

Контейнер за прибиране на реколтата Вакутейнер без антикоагулант със/без отделящ гел 6 .

Необходима е обработка след прибиране на реколтата - отделете серума чрез центрофугиране 6 .

Обем на пробата - минимум 1 ml ser 6 .

Причини за отхвърляне да опиташ - хемолизиран серум 6 .

Стабилност на пробата - отделеният серум е стабилен в продължение на 7 дни при 2-8 ° C; 6 месеца при - 20 ° C 6 .

Метод - Мултиплекс ELISA.

Твърдата фаза е нитроцелулозната мембрана, в която се разпределят алергените (вижте таблицата по-долу със списъка на използваните алергени) и която се съдържа в чип. В първата фаза мембраната се инкубира с разредения серум на пациента, използваният разредител съдържа инхибитор на CCD. След 2-часова инкубация чиповете се измиват старателно, след което в следващия етап се инкубират в продължение на 30 минути с белязана с алкална фосфатаза човешко анти-IgE антитяло. След нов етап на измиване се добавя ензимният субстрат. След като мембраните изсъхнат, интензивността на цвета, получена за всяко алергенно петно, ще бъде измерена с цифров фотоапарат. Получените стойности за специфични IgE ще бъдат предоставени с помощта на софтуер, предназначен за тестване на макрорешетки. Общото ниво на IgE също се определя 6 .

Отчитане на резултатите за специфичен IgE

Докладът, издаден от лабораторията за пациент, ще съдържа:

всички тествани групи алергени, видове алергени (екстракти или молекулни компоненти) и индивидуални специфични стойности на IgE (изразени в kUA/L);
общо ниво на IgE (изразено в kUA/L);
обобщение на откритите сенсибилизации, при които алергенните групи са маркирани с цвят, съответстващ на най-високия идентифициран клас на сенсибилизация 6 .