Вилебранд-антиген фактор + активност

Главна информация

Полуживотът на плазмения FvW е

8-12 часа. Приблизително 15% от циркулиращия FvW се намира в отделението на тромбоцитите, което се получава изцяло от интрамедуларен синтез, но и двата пула FvW са необходими за хемостаза. Ендотелните клетки секретират мултимери, по-големи от циркулиращите в плазмата; те се разграждат от специфична металопротеаза, ADAMTS13, което води до намаляване на размера на най-големите мултимери. Намалената активност на ADAMTS13, вродена или от придобити инхибитори, играе централна роля в патофизиологията на тромботичната тромбоцитопенична пурпура 3; 4 .

FvW има места за свързване за FVIII, хепарин, колаген, тромбоцитни гликопротеини GPIb и GPIIb-IIIa, имащи множество функции в хемостазата. FvW стабилизира FVIII, като го предпазва от инактивиране чрез активиран компютър, като по този начин удължава неговия полуживот в циркулация и ефективно го локализира на мястото на съдово увреждане 1; 2; 4. Всеки FvW мономер има място за свързване за FVIII, но in vivo само 1-2% от мономерите са заети от FVIII, като по този начин се обяснява, че наличието на много големи мултимери не е от съществено значение за носещата функция на FVIII. Промяната в FvW в плазмата обаче е свързана със съответстващи промени в плазмената концентрация FVIII 2 .

FvW е структурен протеин и част от субендотелиалния матрикс. Той също така играе важна роля при прикрепването на тромбоцитите към субендотелните повърхности, особено до умерени до големи сили на срязване (функция, изследвана частично in vivo чрез измерване на времето на кървене), действа като мост между тромбоцитите и насърчава агрегацията на тромбоцитите. Първоначално анкерирането на тромбоцитите възниква на мястото на съдово увреждане чрез взаимодействието на FvW с GPIb, последвано от активиране на тромбоцитите и експозиция на GPIIb-IIIa, който свързва фибриноген, FvW и други лиганди 1; 4. И двете FvW свързващи дейности са максимални при мултимери с високо молекулно тегло. Взаимодействието между GPIb и FvW може да бъде изследвано in vitro чрез добавяне на антибиотика ристоцетин 2 .

Номенклатурата, препоръчана от Международното дружество по хемостаза и тромбоза за комплекса FVIII-FvW, е 2:

Активност на кофактор на ристоцетин

Активност на свързване на колаген

Капацитет за свързване FVIII

Аномалиите на FvW причиняват болестта на von Willebrand (vWD), най-често срещаната наследствена хеморагична болест, с преобладаване приблизително 1% сред общата популация, но с клинично значимо разпространение на заболяването 1: 1000 4. Състоянието се характеризира с кожен-лигавичен кръвоизлив, автозомно-доминантно предаване и продължително време на кървене. Болестта не е хомогенна, от една страна, поради множеството физиологични функции, изпълнявани от FvW, и от друга страна, чрез демонстрация на различни генетични модели. Приблизително 60% от промените в нивата на FvW в плазмата се дължат на генетични фактори. По този начин хората с кръвна група 0 имат нива на FvW средно с 30% по-ниски от тези с други кръвни групи. Освен това нивото на FvW е под хормонален контрол; влияе се и от други фактори, които усложняват изразяването на болестта. Съобщава се за вариации до 20% с менструалния цикъл, като най-ниските нива са регистрирани в ранната фоликуларна фаза. Нивото също се увеличава с

15% за всяко десетилетие на стареене 3. Настоящата vWD класификация идентифицира две основни категории 2; 3; 4:

Съобщени са и други подтипове, включително тип тромбоцити (псевдо-vWD) в резултат на мутации в GPIb на тромбоцитите. Съществуват и много редки придобити форми на vWD, свързани с наличието на автоантитела, във връзка с автоимунни заболявания, клонална пролиферация, хипотиреоидизъм 4; 6; 7 .

Препоръки за тестване - диагностика на дефицит/аномалия на FvW, подтип на vWD и диференциация от хемофилия А (заедно с определяне на активността на FVIII); мониторинг на терапевтичната ефикасност на лечението с дезмопресин или концентрат на FvW (FvW: RCo) 7 .

Обучение на пациента - на гладно (на гладно) 5. Трябва да се избягва лечение с перорални антикоагуланти 2 седмици преди и хепарин два дни преди тестването; няма да се събира от хепаринизиран катетър 6. Тестовете трябва да се извършват на разстояние от трансфузия, заместващо лечение с FvW, приложение на дезмопресин 7 .

Събран образец - венозна кръв 5 .

Контейнер за прибиране на реколтата - вакуутан с 0.105М Na цитрат (натриев цитрат - кръвно съотношение = 1/9). Налягането, което упражнява турникетът, трябва да бъде между стойността на систоличното налягане и това на диастоличното налягане и не трябва да надвишава 1 минута. Ако венозната пункция се провали, нов опит за същата вена може да се направи само след 10 минути .

Количество прибрано - 2 прахосмукачки ще бъдат събрани, колкото вакуумът позволява; за да се предотврати частичната коагулация на пробата, ще се осигури правилното смесване на кръвта с антикоагуланта чрез инверсионни движения на тръбата 5 .

Необходима е обработка след прибиране на реколтата - пробата ще бъде центрофугирана в продължение на 15 минути при 2500 g, веднага последвано от плазмено разделяне и замразяване; пробите, събрани извън лабораторията, ще бъдат транспортирани до контейнера, предназначен за замразени проби 5 .

Причини за отхвърляне на доказателствата - вакутейнер, който не е пълен; хемолизирана или коагулирана кръвна проба; плазма, която не е била замразена в лабораторията 5 .

Стабилност на пробата - отделената плазма е стабилна за 4 седмици при - 20 ° C 5 .

FvW: Ag - имунотурбидиметричен: измерва нивото на FvW, независимо от състава на плазмените мултимери (латексови частици, увити в специфични анти-FvW поликлонални антитела аглутинатират в присъствието на FvW антиген, увеличавайки оптичната плътност, пряко пропорционална на концентрацията на FvW в тестваната плазма) .

FvW: RCo - плазмата на пациента се смесва с тромбоцити, фиксирани във формалин, в присъствието на ристоцетин, а степента на агрегация на тромбоцитите се открива фотооптично и е пропорционална на активността на плазмата FvW 6 .

Референтни стойности 5

Антиген:

15 дни - 1 месец	46 - 220%
1–5 месеца	36 - 217%
5 -11 месеца	48 - 199%
11 месеца - 5 години	41 -186%
5 - 10 години	45 -145%
10 -17 години	56 -123%
> 17 години - Хора с кръвна група O	42-141%
> 17 години - Хора с кръвна група A, B или AB	66-176%

2. ДЕЙНОСТ:

Хора с кръвна група O	40-125%
Хора с кръвна група A, B или AB	49-163%

Тълкуване на резултатите

vWD трябва да се има предвид при диференциална диагноза на всеки пациент с лична и фамилна анамнеза за кървене, който има нормални PT и aPTT. aPTT може да бъде удължен при тежки форми на vWD с ниски нива на FVIII 6. Броят на тромбоцитите също обикновено е нормален, но при пациенти с тип 2В може да се появи тромбоцитопения. Времето за кървене обикновено се удължава, но може да бъде нормално при леки форми на vWD.

Таблицата показва модификациите на двата специфични теста за FvW заедно с активността на FVIII в различните видове vWD 2; 6; 7